鳳丹和紫斑兩個(gè)品種可以用于加工牡丹子油，鳳丹因其結(jié)實(shí)量大且適應(yīng)性強(qiáng)是當(dāng)前油用牡丹的主栽品種。鳳丹的自然繁殖方式為專性有性繁殖，在生產(chǎn)中存在著種子萌發(fā)率和幼苗質(zhì)量不穩(wěn)定等問題。鳳丹種皮蠟質(zhì)較厚較堅(jiān)硬，發(fā)芽生根很困難，今天 網(wǎng)小編主要和大家談?wù)劜煌幚韺?duì)鳳丹牡丹種子萌發(fā)的影響！

1 材料與方法

試驗(yàn)在武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院林果科技示范園進(jìn)行，年均降水量1000～1200mm，年均日照時(shí)數(shù)1540～2180h，年均氣溫15.6℃，年無霜期255d，屬亞熱帶季風(fēng)氣候。試驗(yàn)地為湖淤*，*壤上層為黏*，下層為沙*，地下水水層較淺，約10m。*壤pH7.73、有機(jī)質(zhì)1.66%、全氮0.138%、有效磷10.7mg／kg、速效鉀84.2mg／kg。

1.1 試驗(yàn)材料

供試鳳丹牡丹種子于2014年10月購于鳳丹牡丹的原產(chǎn)地安徽亳州，為成熟的陰干種子。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 種子比重分級(jí) 按種子的比重進(jìn)行分級(jí)篩選。去除種子中的雜質(zhì)，自來水清洗數(shù)次，除去種子表面的灰塵，加入適量的自來水浸泡1 d，收集沉在底部的種子定義為Ⅰ級(jí)種子；換水后，將上浮的種子繼續(xù)浸泡1 d并收集沉在底部的種子定義為Ⅱ級(jí)種子；仍然上浮的種子則定義為Ⅲ級(jí)種子。

1.2.2 千粒重測定 采用百粒重測定不同級(jí)別油用牡丹種子的質(zhì)量。隨機(jī)從各級(jí)種子中選取100粒并稱重，重復(fù)3次，取其平均值×10。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 浸種時(shí)間對(duì)生根的影響 將用水選方法浸種的鳳丹牡丹種子用50%的多菌靈可濕性粉劑1000倍稀釋液消毒30min，用清水沖洗干凈，然后用常溫水浸種，浸種時(shí)間設(shè)置3個(gè)處理，分別為12、24、48h，每處理100粒種子，3次重復(fù)。處理后撈起攤放陰涼處至種子外皮收干。將種子分鋪于經(jīng)過50%的多菌靈可濕性封劑800倍稀釋液消毒過的沙床中，每層覆沙4cm，沙的含水量為10%～15%，沙子的濕度為以手握成團(tuán)不出水為好，貯藏的地點(diǎn)是普通大棚，溫度范圍為23～25℃。層積時(shí)間為15d，統(tǒng)計(jì)種子的生根情況。

1.3.2 沙藏層積時(shí)間對(duì)生根的影響 經(jīng)過消毒的種子用常溫水浸泡24h后晾干。將種子分鋪于經(jīng)過50%的多菌靈可濕性粉劑800倍稀釋液消毒過的沙床中，每層覆沙3～5cm，沙的含水量為10%～15%，沙子的濕度為以手握成團(tuán)不出水為好，貯藏的地點(diǎn)是普通大棚，溫度范圍為23～25℃。層積時(shí)間設(shè)置3個(gè)處理，分別為5、10、15d，每處理100粒種子，3次重復(fù)。并統(tǒng)計(jì)種子的生根情況。

1.3.3 不同級(jí)種子發(fā)芽率比較 將用水選方法分級(jí)的鳳丹牡丹種子，用50%的多菌靈可濕性粉劑1000倍稀釋液消毒30min，用清水沖洗凈，后用濃度為150mg／L的GA3處理12h，播于經(jīng)過50%的多菌靈可濕性粉劑800倍稀釋液消毒過的沙床中，每級(jí)為一個(gè)處理，每個(gè)處理100粒種子，3次重復(fù)。180d后統(tǒng)計(jì)出苗率。

1.3.4 不同處理對(duì)發(fā)芽率的影響 處理1：取種子18000粒，分為3份，將每份種子和沙子按1∶3的體積比混合，常溫層積，層積時(shí)間10、20、30d。其中，層積沙子濕度以手握成團(tuán)不出水為宜，沙子在使用前用130℃高溫殺菌1h。層積過程中每隔3～4d攪動(dòng)1次，并適當(dāng)補(bǔ)水，保持良好的水分和通氣狀態(tài)，并觀察種子的變化。

處理2：分別用清水和濃度為100、150、200、400、500、600、700、800、900 mg／L的赤霉素（GA3）在25℃恒溫下浸泡種12、24、36h，然后把種子撈出洗凈。

處理3： 分別用濃度為20、40、60、80、100 mg／L的植物生長調(diào)節(jié)劑GGR6浸泡種子，以清水處理的為對(duì)照。

處理4：將種子浸泡于20、40、60℃水中24h，每個(gè)處理3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100粒種子。

處理完后種子統(tǒng)一播種于穴盤，穴盤基質(zhì)配方為60%泥炭＋20%珍珠巖＋20%蛭石，播種120、180d時(shí)統(tǒng)計(jì)穴盤苗發(fā)芽情況，180d時(shí)的發(fā)芽率為最終發(fā)芽率。

1.3.5 不同播種苗床的育苗試驗(yàn) 將成熟的鳳丹種子用50%的多菌靈可濕性粉劑1000倍稀釋液消毒30min，用清水沖洗凈后用常溫水浸種12h，分鋪于經(jīng)過50%的多菌靈可濕性粉劑800倍稀釋液消毒過的沙床中，每層覆沙4cm，沙的含水量為10%～15%，沙子的濕度為以手握成團(tuán)不出水為好，貯藏的地點(diǎn)是普通大棚，溫度范圍為23～25℃，將種子層積15 d后用濃度為150mg／L的GA3浸泡12h，分別播于經(jīng)過50%的多菌靈可濕性粉劑800倍稀釋液消毒過的育苗沙床和*床中，*床和沙床的規(guī)格相同，各播100粒，3次重復(fù)。播后180d時(shí)統(tǒng)計(jì)出苗率。

1.3.6 沙床播種育苗 將經(jīng)過沙藏15d生根的種子播于經(jīng)過50%的多菌靈可濕性粉劑800倍稀釋液消毒過的育苗沙床（9月上旬在苗圃地附近選擇地勢平坦、排水良好的地塊上面建沙床，沙床用石灰磚砌成，沙床寬1.0～1.2 m，長度因所選地塊確定，從地面往上的高度約20cm，沙厚16～18cm，苗床間距為40cm，填充沙為新鮮河沙，粗度為0.3mm）中，采用條播的方式，將沙藏后的種子（根長1.5～2.0cm）播種于沙床中，將種子均勻?yàn)⒃跍蟽?nèi)，行距6cm，溝深2～3cm，然后覆沙、蓋平并用薄草簾覆蓋，用噴壺淋水，每天淋1～2次保證苗床濕潤，苗床上方用60%的遮陽網(wǎng)遮陽。統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽時(shí)間和發(fā)芽率。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的整理和計(jì)算，用SPSS19.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，借助Origin 8.0軟件作圖。發(fā)芽率和發(fā)芽勢計(jì)算公式如下：

發(fā)芽率＝發(fā)芽的總粒數(shù)／供試種子數(shù)×100%

發(fā)芽勢＝規(guī)定天數(shù)內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)／供試種子數(shù)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 鳳丹牡丹種子特性

總體上鳳丹牡丹子粒較為飽滿，色澤均勻，雜質(zhì)種類和含量少（質(zhì)量約占總質(zhì)量的0.63%），主要是破損的種子和少量小石塊。種子由種皮、種胚和胚乳3部分構(gòu)成。胚乳占種子的絕大部分，種胚較小，高度約為種子的1／3，位于胚乳（種子）中央一端，其圓錐狀的胚根伸出胚乳，頂端伸進(jìn)種孔之中；子葉2片，呈卵圓形，伸入胚乳中央的裂隙之中，內(nèi)部的原形成層束十分明顯；兩片子葉中間有一小的胚芽，胚軸粗短，子葉的寬度明顯大于胚軸的直徑，但厚度較小。

2.2 浸種時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子生根的影響

試驗(yàn)通過分析不同浸種時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子生根的影響，結(jié)果下圖表明，浸種時(shí)間在12～48 h內(nèi)，對(duì)生根率影響不大，種子生根率均在99%以上；雖然隨著浸種時(shí)間的延長，種子的主根長逐漸增加，但其差異并不顯著，表明浸種12～48 h對(duì)主根長的伸長無顯著影響。

圖1 浸種時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子生根的影響

圖中同一曲線上不同小寫字母表示差異顯著（P＜0.05）；下圖同

2.3 沙藏層積時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子生根的影響

沙藏層積結(jié)果下圖顯示，不同層積時(shí)間能夠顯著性影響鳳丹牡丹種子的生根率，隨著沙藏時(shí)間從5 d延長到15 d，種子的生根率從30%提高到接近100%，在一定程度上說明鳳丹牡丹種子采收后需要沙藏，以完成生理后熟。

圖2 沙藏層積時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子生根的影響

2.4 不同等級(jí)鳳丹牡丹種子對(duì)發(fā)芽率的影響

肉眼可將種子按大小分為3級(jí)，Ⅰ級(jí)種子直徑大于1.0cm，子粒飽滿，單粒重約0.3 g；Ⅱ級(jí)種子直徑在0.8～1.0 cm之間，子粒相對(duì)飽滿，單粒重約0.2 g；Ⅲ級(jí)種子直徑小于0.8 cm，單粒重0.1～0.2 g。然而這種分級(jí)方法需要一粒一粒進(jìn)行測量，非常繁瑣，并且大粒種子的質(zhì)量有待進(jìn)一步考證。隨后，本研究利用種子的比重不同，將種子浸入水中后出現(xiàn)下沉或上浮的現(xiàn)象，根據(jù)這一現(xiàn)象進(jìn)行種子分級(jí)。清洗后種子顏色為深棕色，表面發(fā)亮。按種子比重分級(jí)后發(fā)現(xiàn)：千粒重（干重）：Ⅱ級(jí)（240.17 g）＞Ⅰ級(jí)（223.5 g）＞Ⅲ級(jí)（203.55 g）；吸水率：Ⅲ級(jí)（66.61%）＞Ⅱ級(jí)（52.2%）＞Ⅰ級(jí)（43.97%），表明Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)種子的飽滿度顯著低于Ⅰ級(jí)種子。進(jìn)一步表明種子的大小和質(zhì)量不能作為評(píng)判種子級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)，大粒種子如果干癟則只能歸于Ⅲ級(jí)種子，本研究通過種子比重方法進(jìn)行分級(jí)是切實(shí)可行的。

本研究通過分析不同等級(jí)鳳丹牡丹種子對(duì)發(fā)芽率的影響，結(jié)果（表1）表明，通過比重方法分級(jí)后，不同等級(jí)鳳丹種子出苗率差異顯著，其中Ⅱ級(jí)種子的出苗率高達(dá)99%，Ⅲ級(jí)種子的出苗率最低，為62%。這也正好印證了前面應(yīng)用比重法對(duì)鳳丹牡丹種子進(jìn)行分級(jí)的可行性。在比重法分級(jí)里，Ⅱ級(jí)種子的千粒重大于Ⅰ級(jí)種子，Ⅲ級(jí)種子的千粒重最小，與發(fā)芽率正好吻合，這也說明了種子萌發(fā)率跟種子的體積大小無關(guān)，而跟種子的飽滿度有直接關(guān)系。

表1 不同等級(jí)鳳丹牡丹種子對(duì)出苗率的影響

注：表中同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著（P＜0.05）。

2.5 不同水溫浸種對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響

從下圖可以看出，清水浸泡鳳丹種子24 h后，隨著水溫的升高，種子的發(fā)芽率逐漸降低，但差異不顯著，表明常溫或極端溫度不影響鳳丹牡丹種子的發(fā)芽率。

圖3 不同水溫處理對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響

2.6 沙藏時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響

鳳丹牡丹種子經(jīng)不同時(shí)間沙藏處理后發(fā)芽情況見下圖。由下圖可見，種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率隨沙藏時(shí)間從0～30d逐漸加長時(shí)，呈現(xiàn)先增大后降低的規(guī)律。20d是一個(gè)分隔點(diǎn)，此時(shí)種子發(fā)芽勢為80%，發(fā)芽率達(dá)到96%，發(fā)芽情況最好；而未沙藏的發(fā)芽勢僅為12%，發(fā)芽率為27%，發(fā)芽情況最差；沙藏30 d的發(fā)芽勢為61%，發(fā)芽率為64%。未沙藏的種子發(fā)芽率最低可能與鳳丹種子沙藏時(shí)的生理后熟有關(guān)，最佳的生理后熟時(shí)間為20d左右，而沙藏30 d發(fā)芽率只有65%，這可能是沙藏30 d時(shí)鳳丹種子的根已經(jīng)很長，此時(shí)播種到穴盤傷了根，后期種子不能發(fā)芽所致。

圖4 沙藏時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響

2.7 赤霉素處理對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響

牡丹種子經(jīng)不同濃度GA3處理不同時(shí)間后，研究種子發(fā)芽的情況，結(jié)果顯示，不同濃度GA3處理不同時(shí)間能顯著影響鳳丹牡丹種子發(fā)芽率，鳳丹牡丹種子在GA3濃度為150 mg／L浸種12 h以上，發(fā)芽率可達(dá)到90%以上，其中GA3濃度為150 mg／L處理12 h和24 h，鳳丹牡丹種子的發(fā)芽率可達(dá)到99%。當(dāng)GA3濃度大于150 mg／L時(shí)，種子的發(fā)芽率隨浸種時(shí)間的延長而降低，當(dāng)GA3濃度小于150 mg／L時(shí)，種子的發(fā)芽率隨浸種時(shí)間的延長而增大。當(dāng)GA3濃度在400～900 mg／L時(shí)，發(fā)芽率均隨浸種時(shí)間的延長而降低，處理36 h，種子的發(fā)芽率還不到10%。這表明GA3濃度低時(shí)，能夠通過延長浸種時(shí)間提高種子的發(fā)芽率；而高濃度的GA3對(duì)種子發(fā)芽存在抑制作用，且處理時(shí)間越長抑制作用越明顯。在實(shí)際種植中，選擇150 mg／L GA3浸種12h即可。

2.8 GGR6處理對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響

40～60 mg／L的GGR6處理，在處理時(shí)間為12 h時(shí)，基本上不影響鳳丹牡丹種子的發(fā)芽率；隨著處理時(shí)間延長至24和36 h時(shí)，能夠顯著抑制種子發(fā)芽。60 mg／L GGR6浸種36 h時(shí)，種子的發(fā)芽率小于50%。經(jīng)過激素（GA3和GGR6）處理的種子均存在一個(gè)現(xiàn)象，即加入激素后，種子的發(fā)芽率隨浸種時(shí)間的延長而降低，而對(duì)照中經(jīng)清水浸泡的種子，其發(fā)芽率隨浸泡時(shí)間的延長而增加，這表明，適當(dāng)浸泡能夠促進(jìn)種子的發(fā)芽，而GA3和GGR6卻抑制種子發(fā)芽。

2.9 鳳丹牡丹育苗床試驗(yàn)結(jié)果

本研究通過鳳丹牡丹*床和沙床播種效果的比較，其種子發(fā)芽情況見表。沙床育苗和*床育苗種子發(fā)芽率差別很大，沙床種子的發(fā)芽率為99.33%，而*床僅為68.67%，且沙床種子發(fā)芽時(shí)間較*床早8d。沙床的通透性好，利于鳳丹牡丹種子發(fā)芽，由此可見，鳳丹牡丹種子育苗更適宜于沙床育苗。

3 小結(jié)與討論

3.1 牡丹種子分級(jí)

牡丹種子分級(jí)一般以生根率、發(fā)芽率及凈度作為主要參考指標(biāo)，生活力、千粒重、含水量作為重要參考指標(biāo)，并結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)來進(jìn)行，缺乏簡單快捷有效的分級(jí)方法；趙葉等研究了浸種時(shí)間對(duì)鳳丹牡丹種子發(fā)芽的影響，結(jié)果顯示下沉層種子的的露白率、生活力、α－淀粉酶活性最高，鳳丹牡丹種子的最佳浸種時(shí)間為2 d。而本研究充分結(jié)合前人的研究，利用鳳丹牡丹種子的比重不同，采取水浸種后種子的下沉和上浮現(xiàn)象進(jìn)行種子分級(jí)，研究表明，種子的品質(zhì)與質(zhì)量相關(guān)性不大，與吸水率呈反比。這樣既簡化了分級(jí)試驗(yàn)的復(fù)雜與繁瑣性，又能使種子達(dá)到最佳的浸種時(shí)間，利于后續(xù)的播種。

3.2 種子的雙重休眠特性

芍藥屬種子具有典型的胚休眠特性，包括胚根（下胚軸）和胚芽（上胚軸）在內(nèi)的雙重休眠，尤其是上胚軸的休眠更為深沉，是造成種子發(fā)芽緩慢、發(fā)芽率低以及發(fā)芽不整齊的主要原因。在黃牡丹和鳳丹中，這種休眠可能更復(fù)雜，存在胚根與胚芽二次休眠和生理后熟的現(xiàn)象。種子休眠的原因主要分為2個(gè)方面：

一方面是由于胚以外的外源因素的限制，包括胚乳、種皮和果皮形成的物理屏障，導(dǎo)致種子的透水性差；種皮中存在抑制種子發(fā)芽的化學(xué)物質(zhì)。

另一方面是由于胚本身的原因造成的：胚的形態(tài)和生理不成熟，需要胚乳提供營養(yǎng)物質(zhì)，完成其生長發(fā)育，或通過低溫后熟促進(jìn)種子發(fā)芽；缺乏調(diào)控發(fā)芽的激素或存在抑制種子發(fā)芽的化學(xué)物質(zhì)，內(nèi)源抑制物質(zhì)有許多種，較為常見的為脫落酸、香豆素、富含氨的含氮化合物、檸檬酸、酒石酸、醋酸、丁烯酸、水楊酸、蘋果酸、脂肪酸、檸檬醛和肉桂醛等，往往是多種抑制物協(xié)同作用抑制種子發(fā)芽。

對(duì)于芍藥屬的不同植物而言，對(duì)種子生根和發(fā)芽的主要抑制機(jī)制存在較大差異。牡丹種子發(fā)芽困難或發(fā)芽時(shí)間長的主要原因不是由外源因素導(dǎo)致的種子透水性透氣性差引起的，很有可能是胚未完全成熟造成的。牡丹種子發(fā)芽過程表現(xiàn)出階段性變化，并要求有相應(yīng)的溫度變化過程，不同種類之間，不同發(fā)芽階段所要求的溫度及持續(xù)時(shí)間的長短有差異。油用牡丹鳳丹種子的發(fā)芽包括后熟、暖溫長根（25℃）和低溫春化長芽（15℃）階段，分別需要40、30和60 d左右的臨界時(shí)間，某一階段所需的條件不能得到滿足或不按其順序進(jìn)行，種子均不能發(fā)芽成苗。

打破種子休眠的方法主要有物理和化學(xué)法。物理法主要包括溫度、機(jī)械、超聲波、射線、電場和層積處理等；化學(xué)法包括無機(jī)化學(xué)藥劑、有機(jī)化學(xué)藥劑和激素處理。層積處理是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上常用的解除胚生理后熟的方法，一般在0～10℃，適溫多為3～5℃，所用介質(zhì)是通氣良好的沙或蛭石。層積能夠有效促進(jìn)胚形態(tài)發(fā)育成熟、調(diào)節(jié)激素變化、抑制物質(zhì)降解、提高酶活力、促進(jìn)基因表達(dá)、使低溫下種皮透性增強(qiáng)、提高呼吸速率、降低胚對(duì)脫落酸的敏感性。層積處理同時(shí)有利于胚根的發(fā)芽，本研究也發(fā)現(xiàn)沙藏層積能夠有效的促進(jìn)種子生根和萌芽；GA3也能夠提高種子生根率，100～200 mg／L低濃度處理有利于提高生根率與生根質(zhì)量。研究表明調(diào)控上胚軸休眠的主要物質(zhì)存在的關(guān)鍵部位是子葉、上胚軸或胚芽。當(dāng)牡丹種子生根后，若不變換溫度條件（20℃），讓其繼續(xù)生長，種子則會(huì)一直保持生根生長，雖然中胚軸和上胚軸有所膨大，但不會(huì)出芽，低溫（4℃）能夠打破上胚軸休眠的過程，抑制劑脫落酸含量呈現(xiàn)顯著性下降，提高種子發(fā)芽率，其原因可能是低溫處理期間，種子的內(nèi)含物發(fā)生了變化。

上胚軸休眠的解除與根的長度存在直接關(guān)系，胚根長到3cm以上，才能催芽成功。GA3能取代低溫使種子通過生理后熟期，解除植物的休眠，也可促進(jìn)種子發(fā)芽，能打破黃牡丹種子胚根的休眠，并能有效地打破上胚軸的休眠。 本研究明確了GA3的作用方式，即存在一個(gè)濃度拐點(diǎn)（150mg／L），濃度低于此拐點(diǎn)時(shí)，種子發(fā)芽率隨濃度的增加而增大，而高于此拐點(diǎn)后，種子發(fā)芽率隨濃度的增加而降低。6－BA能提高牡丹當(dāng)年種子和陳種子的發(fā)芽率，一定濃度的GGR6抑制種子的發(fā)芽。單用GA3和6－BA處理牡丹種子，促進(jìn)發(fā)芽的效果不明顯，這可能是由于牡丹種皮較厚，激素不容易到達(dá)胚乳的部位，不能發(fā)揮作用所致。近年來，打破種子休眠的方法開始采用綜合方法，而不單單使用一種處理，為破眠技術(shù)提供了新思路。如溫水浸泡結(jié)合激素處理，其種子發(fā)芽率顯著性高于僅用激素處理的。

網(wǎng)小編總結(jié)，本研究播種育苗試驗(yàn)，一是利用鳳丹種子的比重不同，采取水浸法進(jìn)行種子分級(jí)，既簡化了分級(jí)試驗(yàn)的復(fù)雜與繁瑣性，又能使種子達(dá)到最佳的浸種時(shí)間，利于后續(xù)的播種；二是明確了GA3的作用方式，存在一個(gè)濃度拐點(diǎn)，濃度低于此拐點(diǎn)時(shí)，種子發(fā)芽率隨濃度的增加而增加，而高于此拐點(diǎn)后，種子發(fā)芽率隨濃度的增加而降低，GA3處理能大幅提高播種出苗率，達(dá)到99%。